UV / VIS-spectroscopie – Hoe een spectrofotometer te gebruiken
In dit artikel laten we u zien hoe u een UV-zichtbare spectrofotometer gebruikt. Instrument: Shimadzu UV-1800 UV-spectrofotometer.
Dit zijn de UV-zichtbare spectrofotometers met dubbele bundel in de instrumentenkamer in het algemene onderwijslaboratorium van de National University of Singapore.
Houd er rekening mee dat de aan / uit-schakelaar zich aan de rechterkant van de spectrofotometer bevindt.
Here are all the apparatus that you need for this setup: a solvent bottle, a waste beaker, a pair of quartz cuvettes, and a volumetric flask containing your solution.
Het monster wordt voor meting in de cuvet geplaatst.
Er zijn drie soorten cuvetten: plastic, glas en kwarts.
Een gemeenschappelijk kenmerk van onze cuvetten is dat ze elk twee tegenover elkaar liggende ondoorzichtige plaatsen en twee tegenover elkaar liggende transparante plaatsen hebben.
U houdt een cuvettenbinder vast op ondoorzichtige grootte, de transparanten zijn bedoeld voor het pad van het UV- of zichtbaar licht.
Dit is de UV-zichtbare spectrofotometer:
Om een scan uit te voeren, heeft u een paar cuvetten nodig:
Voor de eerste run moeten we een blanco oplossingsscan doen, wat betekent dat zowel de “referentie” als het “monster” alleen het oplosmiddel bevatten.
We moeten de cuvetten spoelen met het gebruikte oplosmiddel. Hier gebruiken we water. (Handschoenen dragen is optioneel)
Vul het met het oplosmiddel, doe de dop erop, schud het en giet de vloeistof in de afvalbeker.
Je kunt het opnieuw uitspoelen.
Gebruik nu de Kimwipe om de transparante zijkanten van de cuvette schoon te maken.
We moeten ervoor zorgen dat er geen vingerafdrukken, vet, papierresten, druppels op de transparante maat van de cuvet zitten, omdat er licht doorheen gaat en we willen niet dat de lichtstralen worden gebroken.
Open het deksel van de monsterkamer, plaats de cuvet zoals de transparante plaatsen in oost-west richting zijn, daar komt het licht vandaan.
Er zijn twee cuvettenhouders, gelabeld blanco en monster, dus plaats ze dienovereenkomstig.
Sluit het deksel en voer de automatische nulstelling uit. Er is een handleiding naast de machine geplaatst die u op elk moment kunt raadplegen.
Schakel de machine in en wacht tot deze is geïnitialiseerd. Dus op het bedieningspaneel drukken we op de knop “2” om toegang te krijgen tot het spectrum.
Op het scherm zullen we het scanbereik zien en we moeten dit toewijzen als 800 nm – 400 nm. De absorptiewaarde die we gebruiken is van 0 tot 1,5 A. Zorg ervoor dat de gegevens van deze twee rijen correct worden geïmputeerd.
Na de handmatige druk op Auto zero. U weet dat het klaar is als de spectrofotometer een geluid laat horen.
Haal de monsterkuvet eruit, gooi de oplossing weg en we zijn klaar om onze monsteroplossing te gebruiken. Onthoud dat de cuvet nog steeds wat Auto zero-oplosmiddel bevat, en dat we het een paar keer opnieuw moeten spoelen met onze monsteroplossing om er zeker van te zijn dat de oplossing die we meten niet wordt verdund.
Let bij kwantitatieve analyse op dat het van vitaal belang is dat oplosmiddelresten niet verdunnen en onze resultaten beïnvloeden.
Giet nu langzaam enkele van onze monsters in de cuvet. Zet de dop op, spoel hem af en gooi hem in de afvalbeker. Herhaal de cyclus opnieuw.
Nu kunnen we de cuvet tot 4/5 van de hoogte vullen met de oplossing. Gebruik de kimwipe om de transparante zijkanten schoon te maken, plaats deze in de monsterhouder en sluit het deksel.
Druk op start op het bedieningspaneel. Merk op hoe de grafiek zich vormt. De lijnen volgen van 800 nm tot 400 nm.
En we hebben een piek, de maximale absorptie bij ongeveer 600 nm.
Om in te zoomen, drukt u op F1 en vervolgens op F3 om automatisch te schalen. Nu ziet het spectrum er voller uit.
Druk op Return om de tabbladen te wijzigen. Druk vervolgens op F2 voor gegevensverwerking, gevolgd door “3”.
U kunt zien dat de maximale absorptiegolflengte voor deze verbinding 591 nm is en de absorptiewaarde 0,425. Druk op F2 om het spectrum af te drukken.
Dus dit is een gegevensblad dat mooi is afgedrukt en je ziet de piek de maximale absorptie- en absorptiewaarde die daarmee overeenkomt.
Je bent klaar om te gaan!
We hopen dat je het goed hebt geleerd en deze techniek in het laboratorium onder de knie hebt.
Demonstratie: Dr. Hoang TG
Video / presentatie: Mr. Fung FM
Bron: National University of Singapore
Koppeling: https://www.youtube.com/watch?v=s5uIVQGFDE4