Spectroscopie UV vis – Cum se utilizează un spectrofotometru
În acest articol vă vom arăta cum să utilizați un spectrofotometru vizibil UV. Instrument: Spectrofotometru UV Shimadzu UV-1800.
Acestea sunt spectrofotometrele vizibile UV cu fascicul dublu în sala de instrumente din laboratorul general de predare de la Universitatea Națională din Singapore.
Rețineți că comutatorul de pornire / oprire se află în partea dreaptă a spectrofotometrului.
Here are all the apparatus that you need for this setup: a solvent bottle, a waste beaker, a pair of quartz cuvettes, and a volumetric flask containing your solution.
Proba va fi plasată în cuvă pentru măsurare.
Există trei tipuri de cuvete: plastic, sticlă și cuarț.
O caracteristică comună a cuvetelor noastre este că fiecare are două site-uri opace opuse și două site-uri transparente opuse.
Veți ține un liant de cuvetă pentru dimensiunea opacă, transparențele sunt destinate căii UV sau a luminii vizibile.
Acesta este spectrofotometrul UV vizibil:
Pentru a efectua o scanare, veți avea nevoie de o pereche de cuve:
Pentru prima rundă trebuie să facem o scanare a soluției goale, ceea ce înseamnă că atât „referința”, cât și „eșantionul” conțin doar solventul.
Ar trebui să clătim cuvetele cu solventul utilizat. Aici folosim apă. (Purtarea mănușilor este opțională)
Umpleți-l cu solvent, puneți capacul, scuturați-l și aruncați lichidul în paharul pentru deșeuri.
O puteți clăti din nou.
Acum folosiți Kimwipe pentru a curăța părțile transparente ale cuvei.
Trebuie să ne asigurăm că nu există amprente digitale, grăsimi, scame de hârtie, picături pe dimensiunea transparentă a cuvetei, deoarece lumina trece prin aici și nu dorim ca razele de lumină să fie refractate.
Deschideți capacul camerei de eșantionare, introduceți cuva în modul în care site-urile transparente sunt în direcția est-vest, de unde vine lumina.
Există două suporturi pentru cuvete, etichetate în gol și eșantion, așa că așezați-le corespunzător.
Închideți capacul și faceți reducerea automată. Există un manual amplasat lângă mașină pe care îl puteți consulta oricând.
Porniți aparatul și așteptați inițializarea acestuia. Deci, pe panoul de control, apăsăm butonul „2” pentru a accesa spectrul.
Pe ecran vom vedea intervalul de scanare și ar trebui să-l atribuim ca 800 nm – 400 nm. Valoarea absorbanței pe care o folosim este de la 0 la 1,5A. Asigurați-vă că aceste două rânduri de date sunt imputate corect.
După apăsarea manuală, apăsați Auto zero. Știi că se face când spectrofotometrul emite un sunet.
Scoateți cuva de probă, aruncați soluția și suntem gata să rulăm soluția noastră de probă. Amintiți-vă că cuveta conține încă un solvent Auto zero și trebuie să o clătim din nou cu soluția noastră de probă de câteva ori pentru a ne asigura că soluția pe care o măsurăm nu este diluată.
Luați notă pentru analiza cantitativă, este vital să nu lăsați resturile de solvent să se dilueze și să ne afecteze rezultatele.
Acum turnați încet câteva dintre probele noastre în cuvă. Puneți capacul, clătiți-l și aruncați-l în paharul pentru deșeuri. Repetați din nou ciclul.
Acum putem umple cuva la 4/5 din înălțime cu soluția. Folosiți kimwipe pentru a curăța părțile transparente și așezați-l în suportul pentru probă și închideți capacul.
Apăsați Start pe panoul de control. Observați cum se formează graficul. Liniile urmăresc de la 800 nm la 400 nm.
Și avem un vârf, absorbția maximă la aproximativ 600 nm.
Pentru a mări apăsați F1, apoi apăsați F3 pentru a autoscala. Acum spectrul pare mai complet.
Apăsați pe return pentru a schimba filele. Apoi apăsați F2 pentru prelucrarea datelor, urmat de „3”.
Puteți vedea lungimea de undă de absorbție maximă pentru acest compus este la 591 nm, iar valoarea absorbanței este de 0,425. Apăsați F2 pentru a imprima spectrul.
Deci, aceasta este o foaie de date tipărită frumos și vedeți vârful valoarea maximă de absorbție și absorbanță corespunzătoare acesteia.
Ești bine să pleci!
Sperăm că ați învățat bine și că stăpâniți această tehnică în laborator.
Demonstrație: Dr. Hoang TG
Video / Prezentare: Mr. Fung FM
Sursa: Universitatea Națională din Singapore