Spectroscopie UV vis – Comment utiliser un spectrophotomètre

Dans cet article, nous allons vous montrer comment utiliser un spectrophotomètre UV visible. Instrument: Spectrophotomètre UV Shimadzu UV-1800.

Ce sont les spectrophotomètres UV visibles à double faisceau dans la salle d’instruments du laboratoire d’enseignement général de l’Université nationale de Singapour.

Notez que l’interrupteur marche / arrêt se trouve sur le côté droit du spectrophotomètre.

Here are all the apparatus that you need for this setup: a solvent bottle, a waste beaker, a pair of quartz cuvettes, and a volumetric flask containing your solution.

L’échantillon sera placé dans la cuvette pour la mesure.

Il existe trois types de cuves: en plastique, en verre et en quartz.

Une caractéristique commune de nos cuvettes est que chacune possède deux sites opaques opposés et deux sites transparents opposés.

Vous tiendrez un classeur de cuvette à la taille opaque les transparents sont destinés à la voie de la lumière UV ou visible.

Voici le spectrophotomètre UV visible:

Pour effectuer un scan, vous aurez besoin d’une paire de cuvettes:

Pour le premier essai, nous devons effectuer une analyse de la solution à blanc, ce qui signifie que la «référence» et «l’échantillon» contiennent uniquement le solvant.

Nous devons rincer les cuvettes avec le solvant utilisé. Ici, nous utilisons de l’eau. (Le port de gants est facultatif)

Remplissez-le de solvant, mettez le capuchon, secouez-le et jetez le liquide dans le bécher à déchets.

Vous pouvez le rincer à nouveau.

Utilisez maintenant le Kimwipe pour nettoyer les côtés transparents de la cuvette.

Nous devons nous assurer qu’il n’y a pas d’empreintes digitales, de graisse, de lingettes de papier, de gouttelettes, sur la taille transparente de la cuvette car la lumière passe par ici et nous ne souhaitons pas que les rayons lumineux soient réfractés.

Ouvrez le couvercle de la chambre d’échantillonnage, insérez la cuvette de manière à ce que les sites transparents soient orientés est-ouest, c’est de là que vient la lumière.

Il y a deux porte-cuves, étiquetés blanc et échantillon, alors placez-les en conséquence.

Fermez le couvercle et effectuez la mise à zéro automatique. Il y a un manuel placé à côté de la machine, vous pouvez vous y référer à tout moment.

Allumez la machine et attendez qu’elle s’initialise. Donc, sur le panneau de contrôle, nous appuyons sur le bouton «2» pour accéder au spectre.

Sur l’écran, nous verrons la plage de balayage et nous devrions l’attribuer à 800 nm – 400 nm. La valeur d’absorbance que nous utilisons est de 0 à 1,5A. Assurez-vous que ces deux lignes de données sont correctement imputées.

Après le manuel, appuyez sur Auto zéro. Vous savez que c’est fait lorsque le spectrophotomètre émet un son.

Retirez la cuve d’échantillon, jetez la solution et nous sommes prêts à analyser notre solution d’échantillon. N’oubliez pas que la cuvette contient encore du solvant Auto Zero et que nous devons la rincer à nouveau avec notre solution échantillon plusieurs fois pour nous assurer que la solution que nous mesurons n’est pas diluée.

Attention pour l’analyse quantitative, il est essentiel de ne pas laisser les restes de solvants se diluer et affecter nos résultats.

Maintenant, versez lentement certains de nos échantillons dans la cuvette. Remettez le capuchon, rincez-le et jetez-le dans le bécher à déchets. Répétez le cycle à nouveau.

Maintenant, nous pouvons remplir la cuvette à 4/5 de la hauteur avec la solution. Utilisez le kimwipe pour nettoyer les côtés transparents et placez-le dans le porte-échantillon, puis fermez le couvercle.