Spettroscopia UV vis – Come utilizzare uno spettrofotometro
In questo articolo ti mostreremo come utilizzare uno spettrofotometro UV visibile. Strumento: spettrofotometro UV Shimadzu UV-1800.
Questi sono gli spettrofotometri UV visibili a doppio raggio nella sala strumenti del laboratorio di insegnamento generale dell’Università Nazionale di Singapore.

Tenere presente che l’interruttore di accensione / spegnimento si trova sul lato destro dello spettrofotometro.

Here are all the apparatus that you need for this setup: a solvent bottle, a waste beaker, a pair of quartz cuvettes, and a volumetric flask containing your solution.

Il campione verrà inserito nella cuvetta per la misurazione.

Esistono tre tipi di cuvette: plastica, vetro e quarzo.

Una caratteristica comune delle nostre cuvette è che ognuna ha due siti opachi opposti e due siti trasparenti opposti.
Manterrai un raccoglitore per cuvette di dimensioni opache le trasparenze sono destinate al percorso della luce UV o visibile.

Questo è lo spettrofotometro UV visibile:

Per eseguire una scansione, avrai bisogno di un paio di cuvette:

Per la prima esecuzione dobbiamo eseguire una scansione della soluzione del bianco, il che significa che sia il “riferimento” che il “campione” contengono solo il solvente.
Dobbiamo sciacquare le cuvette con il solvente utilizzato. Qui stiamo usando l’acqua. (Indossare i guanti è facoltativo)

Riempirlo con il solvente, mettere il tappo, agitarlo e gettare il liquido nel becher dei rifiuti.

Puoi risciacquarlo di nuovo.
Ora usa il Kimwipe per pulire i lati trasparenti della cuvetta.

Dobbiamo assicurarci che non ci siano impronte, grasso, residui di carta, goccioline, sulla dimensione trasparente della cuvetta perché qui passa la luce e non vogliamo che i raggi luminosi vengano rifratti.

Aprire il coperchio della camera del campione, inserire la cuvetta in modo che i siti trasparenti siano in direzione est-ovest, da lì proviene la luce.

Sono presenti due supporti per cuvette, etichettati come bianco e campione, quindi posizionarli di conseguenza.

Chiudere il coperchio ed eseguire l’azzeramento automatico. Accanto alla macchina è presente un manuale a cui puoi fare riferimento in qualsiasi momento.

Accendere la macchina e attendere che venga inizializzata. Quindi sul pannello di controllo premiamo il pulsante “2” per accedere allo spettro.

Sullo schermo vedremo l’intervallo di scansione e dovremmo assegnarlo come 800 nm – 400 nm. Il valore di assorbanza che utilizziamo è compreso tra 0 e 1,5 A. Assicurati che queste due righe di dati siano state assegnate correttamente.

Seguendo il manuale premere Auto zero. Sai che è finito quando lo spettrofotometro emette un segnale acustico.
Estrarre la cuvetta del campione, scartare la soluzione e siamo pronti per eseguire la nostra soluzione campione. Ricorda che la cuvetta contiene ancora del solvente Auto zero e dobbiamo risciacquarla di nuovo con la nostra soluzione campione un paio di volte per assicurarci che la soluzione che stiamo misurando non sia diluita.
Prendi nota per l’analisi quantitativa, è fondamentale non lasciare che i residui di solvente si diluiscano e influenzino i nostri risultati.
Ora versare lentamente alcuni dei nostri campioni nella cuvetta. Mettere il tappo, sciacquarlo e gettarlo nel bicchiere dei rifiuti. Ripeti il ciclo di nuovo.

Ora possiamo riempire la cuvetta fino a 4/5 dell’altezza con la soluzione. Utilizzare il Kimwipe per pulire i lati trasparenti e posizionarlo nel supporto del campione e chiudere il coperchio.

Premere Start sul pannello di controllo. Nota come si sta formando il grafico. Le linee stanno tracciando da 800 nm a 400 nm.
E abbiamo un picco, l’assorbanza massima a circa 600 nm.

Per eseguire lo zoom, premere F1, quindi premere F3 per la scalabilità automatica. Ora lo spettro sembra più pieno.

Premi Invio per cambiare le schede. Quindi premere F2 per l’elaborazione dei dati, seguito da “3”.

Puoi vedere che la lunghezza d’onda massima di assorbimento per questo composto è a 591 nm e il valore di assorbanza è 0,425. Premere F2 per stampare lo spettro.
Quindi questa è una scheda tecnica ben stampata e vedi il picco il valore massimo di assorbimento e assorbanza corrispondente ad esso.

Sei a posto!
Ci auguriamo che tu abbia imparato bene e padroneggi questa tecnica in laboratorio.
Dimostrazione: Dr. Hoang TG
Video / presentazione: Mr. Fung FM
Fonte: Università Nazionale di Singapore
Collegamento: https://www.youtube.com/watch?v=s5uIVQGFDE4